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      咨詢熱線

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      乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

      簡(jiǎn)要描述:乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法輔酶Ⅰ系列公司正在出售的產(chǎn)品:麥康凱肉湯USP顆粒 英文名稱:MacConkey Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基顆粒 英文名稱:Rose Bengal Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:300ml/袋*10 10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基顆粒 英文名稱:10% Trypticase Soy Broth 產(chǎn)品規(guī)格:225ml

      • 產(chǎn)品型號(hào):
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時(shí)間:2023-12-29
      • 訪  問(wèn)  量:627

      詳細(xì)介紹

      特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

      產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

      產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

      檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

      產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6326

      產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
      商品介紹:

      測(cè)定意義

      測(cè)定意義:

      LDHEC 1.1.1.27)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。

      測(cè)定原理:

      LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。

      需自備的儀器和用品:

      可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

      所需的儀器和用品:

      可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

      四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

      建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

      樣本和試劑浪費(fèi)!

      1、樣本制備

      組織樣本:

      取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

      勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

      【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

       

      細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

      先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

      提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

      12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

      【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

      4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

      QQ截圖20220307153537.png 

      實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

      一、肝素的配制:

      市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

      肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

      二、血液樣本的收集:

      全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

      選擇抗凝的注意點(diǎn):

      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

      ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

      用于測(cè)定。

      10次 百萬(wàn)堿基級(jí)植物DNAout   常溫

      2 ug P36-Luc P36-Luc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      TPY肉湯 TPY Broth 250g

      100mL 吐溫 -20 Tween-20 室溫密封保存

      D-發(fā)酵管(枯草芽孢桿菌)  20支

      100 T ROS活性氧檢測(cè)試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

      25mL LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)  LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)  常溫保存

      30次 單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒 Single Spore WGA Kit -20℃保存

      2 ug pLVX-AcGFP1-N1 pLVX-AcGFP1-N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      淀粉水解培養(yǎng)基 The Hydrolysis of Starch Medium 250g

      1瓶 OS-RC-2細(xì)胞株 OS-RC-2 低溫運(yùn)輸和保存

      乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Rabbit Anti-Bov IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

      SPATA12  睪特異表達(dá)新基因5抗體 規(guī)格: 0.1ml

      CREG1  E1A激活基因刺激蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

      ZNF420  鋅指蛋白420抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

      CDKN3  細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

      FAM83F  FAM83F蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Mouse Anti-human IgG  小鼠抗人IgG 規(guī)格: 1mg

      ADAM23  去整合素樣金屬蛋白23抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Rabbit anti-MG IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

      phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654)  磷酸化相似瘤抑制基因HUGL抗體 規(guī)格: 0.1ml

      phospho-EGFR (Tyr1016)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 

      注意事項(xiàng):

      1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

      2、對(duì)照管只需要做一管。

      3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

      4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

      對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

      若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

       


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