毛細(xì)線蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品名稱：毛細(xì)線蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒 
規(guī)格： 50次
貨號：BK-P97032
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點優(yōu)勢：
   1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
   2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
魚精蛋白硫酸鹽來源于鮭魚   Protamine sulfate from Salmom  物理性狀及指標(biāo)：  溶解性：…………………在水中的溶解性為：10mg/ml.

重組蛋白A瓊脂糖凝膠6B FF  rProtein A Sepharose FF  技術(shù)指標(biāo)：  基質(zhì)：………………6%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠

豬IgG干粉,豬免疫球蛋白  IgG from pig serum  英文名字：IgG from pig serum  動物血清中免疫球蛋白(IgG)廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、分子生物學(xué)及醫(yī)學(xué)等生命科學(xué)的各個研
0酸三鉀  Potassium phosphate, tribasic trihydrate  分子式：K3PO4.3H2O     分子量：266.31

硫酸銨鋁十二水  Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate  分子式：AlNH4.(SO4)2.12(H2O)      分子量：453.33

硫酸鉻  Chromium(III) sulfate, hydrate  分子式：Cr2(SO4)3•6H2O，  分子量：500.26

硫酸鋰  Lithium sulfate  分子式： Li2SO4     分子量：109.94

硫酸鋁鉀十二水  Aluminum potassium sulfate docecahydrate  分子式：KAl(SO4)2•12H2O，  分子量：474.39
紫脲酸5克  小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit

(預(yù)雜交液)  人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T

五水亞嶙酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium phosphite dibasic pentahydrate，級別：BR，95%，規(guī)格：100克  大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)免疫試劑盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit

1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmino-1,2,3-thicdiczolq 21707-22-  CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原體抗體規(guī)格：48T/96T

1,4-氧氮雜環(huán)已烷，英文名或英文縮寫：Morpholine，級別：2N，200-300目，規(guī)格：25毫克  離子膜通道轉(zhuǎn)運(yùn)功能檢測試劑盒20次
毛細(xì)線蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒乙二酸鈣，英文名或英文縮寫：Calcium oxalate，級別：CP，98%，規(guī)格：25毫克  ELISAKitTE豚鼠端粒酶規(guī)格：48T/96T

NADPHNa4 25mg/100mg/1g原裝 Roche 10621706001  CamelEndothelin1,ET-1ELISAKit駱駝內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DTTP,100MMSOL'NPH7.0*DRYICE*dTTP, 100 mM 溶液, pH 7.0生物技術(shù)級40 MFrozen  人紅細(xì)胞生成素(

注意事項：產(chǎn)品僅用于科研1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。