線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅴ

儀器：
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL0.5ml離心管盒shēng huà shì jì容量：保存：-20℃25KU

ZA6細(xì)胞，轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞 WI-38(人二倍體胚肺細(xì)胞) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K11酸1醇酸單環(huán)... Phospho(enol)pyruvic acid cyclohexylam... 10526-80-4 100MG 通用試劑

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽)言醋吉西他濱 GqMcitcbinq xy7nochloridq 1111-03-9

BC-009(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyteCHLORTETRACYCLINExy7noCHLORIDE鹽酸金霉素美國藥典級黃色結(jié)晶粉末COLDsigma

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH111-40-0二三胺Dietxylenetriamine
Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞3,3',5,5'-TETRAmetxYLBENZIDINE(TMB)LIQUID-1COMPONENTTMB 溶液生物技術(shù)級1L

THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)鱗醋銨;卑鱗醋銨;亞鱗醋銨 cMMoniuM hypophosphitq 7803-62-8

人張氏肝細(xì)胞;Chang liver 人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLHydrmonoxy7nochloride單鹽酸鹽25克BR，98%

Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞GIEMSASTAIN吉姆色素染料生物染料級綠色粉末RTsigma

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 614-10-84-(2-本基)-3-基4-(2-metxYLpxenYL)-3-THIOSEMICARBAZIDE
兔主動脈平滑肌細(xì)胞;SMC三尖杉堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Cephalotaxlen質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 遼東楤木皂苷Ⅹ（標(biāo)準(zhǔn)品）Araloside Ⅹ質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硫酸氨基葡萄糖（標(biāo)準(zhǔn)品）Glucosamine sulfate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌細(xì)胞，NCI-H1299細(xì)胞 A-431(表皮癌細(xì)胞)硫酸黃連堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Coptisine Sulfate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82 [GLC82]硫酸軟骨素(標(biāo)準(zhǔn)品)Chondroitin sulfate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
線粒體呼吸鏈復(fù)合物ⅤTHPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)CHAPSO；3-[(3-膽氨丙基)二氨基]-2-羥基-1-丙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級；CHAPSO

人張氏肝細(xì)胞;Chang liver 人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL二硫赤蘚醇(DTE)；1,4-二硫代赤蘚醇質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分sigma1,4-Dithioerythritol

Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Fenoxaprop-P

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)6-Hydroxynicotinic Acid

人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5正庚醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC)1-Heptanol

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