β-半乳糖苷酶 EC 3.2.1.23

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

PILRB Others Mouse 小鼠 PILRB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-氧度酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口4-Oxo Etodolac

小鼠內(nèi)膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mLN-度酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Methyl Etodolac

H1650-M3人非小細胞肺癌細胞 H1650-M3 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS依維莫司-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Everolimus-d4

IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白D 13223-d4 (氟吡汀代謝產(chǎn)物) 質(zhì)量規(guī)格：美國進口D 13223-d4 (Flupirtine Metabolite)

SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 U937(組織細胞瘤)依匹斯汀質(zhì)量規(guī)格：美國進口Epinastine
人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]3'-Epi 吉西他濱3'-Epi Gemcitabine (Gemcitabine Impurity)質(zhì)量規(guī)格：美國進口

倉鼠腎細胞;HL-1 骨髓瘤細胞，P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 3T3/Fas/com細胞，轉(zhuǎn)基因細胞1'-Epi 鹽酸吉西他濱1'-Epi Gemcitabine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人胚腎細胞;293 [HEK-293]4-羥基雌激素酮4-Hydroxy Estrone質(zhì)量規(guī)格：美國進口

ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 雌激素酮 β-D-葡萄糖苷酸鈉鹽Estrone β-D-Glucuronide  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口

家豬皮膚細胞;SSC-S1?8,9-脫氫雌激素酮 3-硫酸鈉鹽?8,9-Dehydro Estrone 3-Sulfate  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口
大鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL草酸氫鉀容量：250克

OVCAR-3人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS2,2,2-三錄基錄加醋酯 2,2,2-Trichloroqthyl xlonofonmctq 17341-93-4

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)鉬粉容量：250克

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)SCCRAM肉湯容量：RT250克

人臍動脈平滑肌細胞1993-7-23.4-二甲氧基本3,4-Dimetxoxybenzoic acid
β-半乳糖苷酶 EC 3.2.1.23大鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL舒巴坦鈉(標準品)Sulbactam 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

H9c2(2-1)大鼠心肌細胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S甘草酸(β型),18beta-甘草酸18-beta-glycyrrheticacid質(zhì)量規(guī)格：>98%

IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白甘草酸(β型),18beta-甘草酸(標準品)18-beta-glycyrrheticacid質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎小管上皮細胞MREpiCOXOID胰蛋白胨Tryptone 質(zhì)量規(guī)格：BR，進口

視網(wǎng)膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)β-萘黃酮β-Naphthoflavone質(zhì)量規(guī)格：>99%,進分

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