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      葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法

      簡要描述:葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) 英文名稱:Maconkey Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Maconkey Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Mannitol Salt Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)(2015藥典) 英文名

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時間:2023-12-27
      • 訪  問  量:888

      詳細(xì)介紹

      商品介紹:

      測定意義:

      6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

      測定原理:

      6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PGNADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。

      需自備的儀器和用品:

      分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      檢測方法

      貨號

      葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法

      100管/48樣

      微量法

      BK-01S6621

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      實驗結(jié)果判斷我有妙招:

      1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

      操作步驟:

      1. 樣品的準(zhǔn)備:

      a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

      e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

      2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

      b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

      c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      革蘭氏陰性菌(G-)選擇性培養(yǎng)基 Gram Negative Bacteria Selective Medium 250g

      1瓶 SF9細(xì)胞株 SF9 低溫運輸和保存

      亞碲酸鹽肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) Sodium Tellurite Broth Base 250g

      10g 葡聚糖 T-10 Dextran T-10    室溫保存

      50T 大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      20次 蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(14.4-97.4 KD) Protein Marker -20℃保存

      2 ug pYFPlac195 pYFPlac195 低溫運輸,-20℃保存

      50次 一管式病毒DNA-RNAout One-Tube Viral DNA-RNAOUT 溶液A 4℃保存,溶液B和溶液C室溫保存

      2 ug pET-29a pET-29a 低溫運輸,-20℃保存

      BCYE瓊脂基礎(chǔ) BCYE Agar Base 100g

      1瓶 7WD10細(xì)胞株 7WD10 低溫運輸和保存

      葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒微量法CXCL5  上皮中性粒細(xì)胞活化肽78抗體 規(guī)格: 0.1ml

      FAM13B1  FAM13B1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

      GNA12/G protein alpha 12  鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格: 0.1ml

      FRMD4A  FRMD4A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

      LY-86/MD-1  MD-1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

      DUSP2  雙特異性磷酸2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Integrin beta 3/CD61  整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml

      phospho-ERK1/2(Thr202/Tyr204)( p44/42 MAPK)   磷酸化絲裂原活化蛋白激1/2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      HSD17B3  羥類固醇脫17β3抗體 規(guī)格: 0.2ml

      CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Mouse Anti-human IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

      CCDC38  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體 規(guī)格: 0.2ml

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