肌酐Cr測試盒肌氨酸氧化酶法

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CM-M011小鼠肺大動脈內皮細胞*培養基100mL腺苷 2′(3′)-單1酸混合異構體 質量規格：美國進口Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers

小鼠前胃癌細胞;MFC 小鼠甲狀腺上皮細胞*培養基 100mL腺苷5'-二1酸核糖鈉質量規格：美國進口Adenosine 5'-diphosphoribose  salt

人腦微血管內皮細胞 Human8-疊氮-環二1酸腺苷-核糖質量規格：美國進口8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose

NRXN3 Others Human 人 Neurexin-3-beta / NRXN3 人細胞裂解液 (陽性對照) 8-氨基腺嘌呤核苷質量規格：美國進口8-Amino Adenosine

轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1腺苷-5'-二1酸三鋰鹽質量規格：>97%,BRADP.Li3
CL-0364HuT 78(人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2梭菌蛋白酶質量規格：酶活：>50U/mg,進分Clostripain

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 人絨癌細胞VP16耐藥株TNFa轉染，JEG-3/VP16-TNFa細胞 7F2(小鼠雜交瘤細胞)2'-脫氧鳥苷-5'-一1酸二鈉鹽(分子生物學級)質量規格：>98%，分子生物學級dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt

人肺癌細胞;A-427 [A427]三十二烷(standard for GC,≥98.0%(GC))質量規格：standard for GC,≥98.0%(GC)Dotriacontane

CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 人細胞裂解液 (陽性對照) 正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC))質量規格：Standard for GC,>99.5%(GC)1-Heptanol

SV40T轉化的人胚腎細胞;293Tγ -丁內酯（GBL）(standard for GC,≥99.9%(GC))質量規格：standard for GC,≥99.9%(GC)4-Hydroxybutanoic acid lactone
TNF Protein Mouse 重組小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白錫粉100克

大鼠顆粒細胞(RGC)(1×106) U-2 OS, 人骨肉瘤細胞 Human4-氧基本安;隊氧基本安;隊茴香安;隊安基本迷 4-Mqthoxycnilinq;p-cnisidinq;4-cMinocn-isolq;4-MqthoxybqnzqncMinq;p-cMinophqnyl Mqthyl qtqr

人胚肺二倍體細胞;2BS硅膠5KU

IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 皂土5克

人腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL(妥布拉霉素)
肌酐Cr測試盒肌氨酸氧化酶法大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J活性炭(凈水、氣體化,棒,φ4.0mm)Activated charcoal質量規格：凈水、氣體化,棒,φ4.0mm

雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網膜神經節細胞*培養基 100mL活性炭(藥物脫色,200目)Activated charcoal質量規格：藥物脫色,200目

HUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系 Human活性炭(細胞培養級)Activated charcoal質量規格：細胞培養級

TNFRSF11B Others Human 人 TNFRSF11B / OCIF 人細胞裂解液 (陽性對照) 活性炭(植物細胞培養級)Activated charcoal質量規格：植物細胞培養級

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C10X分子篩(干燥劑用) 質量規格：干燥劑用
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。