Cr 小鼠骨膠原交聯ELISA檢測試劑盒

試劑配制：

1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

我司供應的產品僅供科研使用，下列是產品屬性：

產品全稱：Cr 小鼠骨膠原交聯ELISA檢測試劑盒

英文名稱：Cr ELISA Kit

貨號：BKE6504

規格：48T/96T

服務：可提供免費代測服務，以及產品說明書和技術指導等

保存環境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供。

售后服務：

組成及試劑配制 :

1. 酶聯板：一塊(96孔)

2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內配制。

如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔)，實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。

7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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